高速不锈钢离心机的几种分离方法:
差速离心:逐次增加离心力,每次可沉降样品溶液中的一些组份。
差速离心是一种较常用的方法。在这种方法中,离心管在开始时装满了均一的样品溶液。通过在一定速度下一定时间的离心后,就可得到两个部份:沉淀和上清液。
当高速不锈钢离心机离心时,大多数不需要的大颗粒通常会被沉降掉。此时,所需的大部分成分保留在上清液中。然后以更高的速度离心收集的上清液,并沉积所需的颗粒。应适当选择离心时间,以便大部分不需要的较小颗粒保留在上清液中。获得的沉淀物和上清液可以进一步离心,直到达到所需的分离纯度。
密度梯度离心法:可以同时使样品中几个或全部组份分离,具有很好的分辨率。
速率区带法:根据样品中不同粒子所具有的不同的尺寸大小及沉降速度)。大致步骤如下:
离心管内装有密度梯度溶液,溶液的密度从离心管的顶部到底部逐渐增加(正梯度)。小心地将待分离的样品添加到密度梯度溶液的顶部。样品在梯度溶液表面形成负梯度。由于不同大小的颗粒在离心力的作用下在梯度中以不同的速度运动,离心后会形成几个独立的样品区。
注意:样品粒子的密度必须大于梯度液注中任一点的密度。离心过程必须在区带到达管子底部前停止。
等密度离心法(isopycnic):
根据粒子密度的不同。在离心过程中,颗粒移动到与自身相同的密度,形成一个区域。
密度样品的选择应确保梯度范围包括所有待分离颗粒的密度。样品可以是密度梯度上的液体颗粒或均匀分布在密度梯度上的颗粒。离心后,样品颗粒达到其平衡点。
注意:平衡后粒子的分离完全由其密度决定,与时间无关,此时再改变离心转速,只能改变区带的相对位置。
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